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      當前位置:首頁  >  技術(shù)文章

      • 2021

        10-19

        今天小編給大家講講高效液相色譜柱峰形拖尾的9個原因:1.色譜柱物理損壞色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源,解決方法就是更換新柱。2.色譜柱內(nèi)填料污染流動相和樣品中的雜質(zhì)是色譜柱主要污染源。流動相所用的各種溶劑至少是分析純,盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45um溶劑微孔過濾(器)過濾,除去可能存在的微粒。流動相建議現(xiàn)用現(xiàn)配,對于含鹽的溶液尤其注意長置會產(chǎn)生細菌或出現(xiàn)沉淀。此外還得保證儲存流動相的容器清潔。復(fù)雜樣品可選用0.45um...

      • 2021

        10-12

        高效液相色譜柱是由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管的材質(zhì)有很多,比如聚合物、玻璃、不銹鋼等。但是建議柱管用不銹鋼材質(zhì),因為不銹鋼這種金屬耐高壓、耐腐蝕且硬度高,相比于玻璃等材質(zhì)不易摔壞。不過當壓力不高于70Kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管。對于色譜柱柱管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,不銹鋼柱內(nèi)壁會經(jīng)過多次拋光,這是為提高柱效,減小管壁效應(yīng)。0.1μm高光潔度色譜柱柱管能夠快速分析的同時保持超高的柱效;使用壽命長,不僅能夠減少頻繁更換色譜柱帶來...

      • 2021

        9-18

        高效液相色譜柱是色譜分離的核心。一支合適,穩(wěn)定,高效的色譜柱對建立普適性強,重現(xiàn)性好的方法是不可少的。因色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數(shù)的增加,會出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象,一般來說是柱效的下降。此時需要對色譜柱進行再生:(1)反相柱的再生,采用以甲醇:水=90:10(V/V),純甲醇,異丙醇,二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱的量為20~30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。(2)正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲...

      • 2021

        9-7

        高效液相色譜柱性能影響因素有很多,例如,硅膠純度、色譜柱尺寸、顆粒形狀、粒徑、表面積、孔徑,化學性質(zhì)包括鍵合類型、碳覆蓋率、封端,在選擇高效液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。2.如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑...

      • 2021

        8-18

        高效液相色譜柱的鍵合基質(zhì)分為硅膠基質(zhì)、聚合物基質(zhì)等,其中硅膠基質(zhì)應(yīng)用較為廣泛,其特點主要包括以下3方面:(1)低pH值,硅膠鍵合鍵容易水解(pH8)。(2)在接近中性的條件時,硅醇基裸露,顯酸性,不適宜分離堿性化合物。(3)某些硅膠被一定金屬污染,這些金屬會引起峰的不對稱或拖尾,甚至化合物的死吸附。高效液相色譜柱的硅膠基質(zhì)可分為全多孔硅膠微粒、雜化硅膠顆粒和實心核硅膠顆粒。1、全多孔硅膠基質(zhì):全多孔硅膠,以其全多孔的結(jié)構(gòu)特點具有很高的比表面積,故具有很高的柱效。其機械強度大的...

      • 2021

        8-4

        反相色譜是迄今在高效液相色譜中應(yīng)用*泛的技術(shù),主要是因為它適用于分析絕大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。如果污染是因為重復(fù)進樣時強保留物質(zhì)的累積引起的,利用簡單的清洗步驟來除去這些污染物往往就能恢復(fù)其色譜性能。經(jīng)過等度運行后的高效液相色譜柱,有時用90~100%含量的溶劑B(雙溶劑反相系統(tǒng)中洗脫能力較強的溶劑,如甲醇、乙晴、四氫呋喃等)沖洗20個柱體積可以清除污染物(色譜柱的柱體積和空柱管體積概念不同,一根4.6x250mm柱子的柱體積只有2.5ml,2.1x...

      • 2021

        7-19

        液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分,其化學性質(zhì)參數(shù)包括以下幾個方面:1、硅膠基質(zhì)硅膠基質(zhì)是通用的基質(zhì),強度大,化學修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達到1—12)。2、聚合物基質(zhì)聚合物基質(zhì)多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學穩(wěn)定,應(yīng)用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好;但強度較小,有機溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損,批次重復(fù)性較差,商品化色譜柱不多,一般價格較貴。3、載碳量載碳量是基質(zhì)表面鍵合相的比例,載碳量高,則...

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